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應用方向

BeaverBeads? IDA-Nickel Kit（Cat. 70501-K10)用于純化帶有his標簽的PtuA和PtuB蛋白，證實PtuA和PtuB可形成異源寡聚體復合物，揭示了新型抗噬菌體防御系統(tǒng)Septu的分子組裝與抗噬菌體機制研究。

論文解析

       四川大學華西醫(yī)院生物治療全國重點實驗室余雅梅副研究員/陳強研究員團隊在《Nature Structural & Molecular Biology》(IF: 16.8)上發(fā)表論文“PtuA and PtuB assemble into an inflammasome-like oligomer for anti-phage defense”。文章揭示了Septu系統(tǒng)的兩個組件PtuA和PtuB可以組裝成類似炎性小體的寡聚體復合物，PtuA有ATP酶結構域，PtuB有核酸酶活性，該復合物可以大量切割噬菌體的核酸，影響噬菌體的復制。

       研究人員在大腸桿菌BL21(DE3)中共表達了PtuA和PtuB（C端帶有His標簽），利用BeaverBeads? IDA-Nickel Kit（Cat. 70501-K10)純化出PtuB蛋白。SDS-PAGE膠檢測結果顯示PtuA和PtuB可形成穩(wěn)定復合物。并且，原位質譜分析結果發(fā)現，PtuA和PtuB可形成6：2分子比的異源寡聚體復合物，通過切割噬菌體基因組DNA來限制噬菌體的生長。

圖1.PtuA和PtuB復合物冷凍電鏡結構模式圖

圖2.PtuA和PtuB復合物SDS-PAGE跑膠圖

該研究以PtuA和PtuA-PtuB復合物的冷凍電鏡結構為基礎，結合體內活性和蛋白質功能研究，完整闡釋了Septu系統(tǒng)抵抗噬菌體感染的分子機制，并提出這一系統(tǒng)與哺乳動物免疫系統(tǒng)中的NLRC4炎癥小體的作用機制類似，這暗示著哺乳動物免疫系統(tǒng)相關蛋白可能起源于細菌的抗噬菌體防御系統(tǒng)。

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